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生化需氧量（BOD）的测定：是指在好氧条件下（溶解氧≥1ppm），微生物分解有机物质的生物化学氧化过程中所需要的溶解氧量。微生物分解有机物质缓慢，若将可分解的有机物全部分解，约需20天以上的时间。目前国内外普遍采用20℃培养五天所需要的氧为指标，称为BOD5，以氧的毫克/升表示。
测定原理：将待测水样中和到PH在6.5－7.5之间，可用不同量的含有充足溶解氧和需氧微生物菌种的稀释水稀释。
取两份水样分别置于溶解氧瓶中，须全充满，无气泡，加塞，水封。取一份放入20℃培养箱中培养五天，测定溶解氧；另一份当天测定。然后按公式计算每升水中所消耗的氧量。
五日生化需氧量(BOD 5)是水质监测的一个重要
参数,因此熟练诓握BOD的测定方法很重要.BOD5
的典测定方法是标准稀释接种法[1],此法耗时长,技
术条件要求高,受停电等外界因素干扰严重.近年来,
对BOD5测定方法的研究蒭及多个方胑,取得了不少
进展,相关的文献报道很多,笔者拟对BOD5快速测定
方法作一简要E述.
1 增温法快速测定BOD5
BOD5的测定受许多条件的控諩影响,如光照,温
度,培养时间等.增温法就是利用适当提高温度,激化
微生物的活性,加速微生物的分解作用,缩短培养周E
的理,从而改变BOD5的测定条件,达到快速分析.
张金华[2]根据BOD反应动力学理,提出了增温
法快速测定BOD5培养时间糆算公式,并糆算出了适
用绝大多数水样的通用增温培养时间,见表1.
作者简介:石亚斌(1968-),男,四川省安县人,攀枝花钢铁集团公司劳
动卫生防护研究所助理工程师,从事废水分析研究.
360 环境与健康杂志 第17卷
表1 水样通用增温培养时间
培养温度()20 25 27 30 32 35 37
培养时间(d) 5.0 3.5 3.0 2.4 2.0 1.6 1.4
由此可知:
他通过对增
温法快速测定BOD5理论上准确性和可行性的分析,
以及大量应用例证的分析,证明增温法快速测定
BOD5所需培养时间在实际应用中是可行的.根据E
理论,有为了验
证此法,利用BOD2.430来预报BOD5.020,如表2所示,污
水BOD5.020的实测值与预报值的比较中可以看出,预
报的最大绝对误差为10.0mg/L,最大相对误差为
5.9%,E均绝对误差为0.8mg/L,E均相对误差
为-0.5 %.因此增温法快速测定BOD5 的预报精度
较高,可应用于实际.
表2与及之间的换算比较
序号
BOD2.030
(mg/L)
BOD2.430
(mg/L)
BOD5.020
(mg/L)
相对回收率
(%)
绝对误差
(mg/L)
相对误差(%)
1 2 3
4 5 6
7 8 9
10
37 43 61
66 73 81
94
112126
137
43 50 71
77 85 95
110131
148160
45 53 69
78 83 90
113127
150170
96 94
103 99
102106
97
103 99
94
+2.0
+3.0
-2.0
+1.0
-2.0
-5.0
+3.0
-4.0
+2.0
+10.0
-4.4
-5.7 2.9
-1.3 2.4
5.6
-2.7 3.1
1.3
-5.9
E均 99 0.8 -0.5
专家们认为高温法虽缩短了分析周E,以利于符
合管理要求为E优点,但测定结果的精密度较差,仅适
合于对待定废水的控諩分析,只在特定条件下才具可
比性,此法还有待进一步探讨.
2 相关估算法
刘会君[3]对BOD5与CODcr之间的线性关系做了
大量分析,他得出了同一性质的工业废水中,BOD5与
CODcr磂在着一定的相关性,不同性质的工业废水中,
BOD5与CODcr相关式中的参数a与b有很大差异的
结论,他认为BOD5与CODcr的相关关系应按行业的
不同来分别确定.要求回归方程浓度范围不能过大,否
则会导致糆算结果E差增大,对于浓度波动大的废水
可适当分n个浓度区间来建立BOD5与CODcr的相关
关系式,得出的结果才更为合理及准确.用CODcr的实
测值来估算BOD5省时,省力,对指导研究工业废水有
机污染,污染水E,生物降解有一定的参考价值.
为了验证此法,收集了生化废水(用微生物对炼焦
工艺水进行脱酚,脱氰处理后的废水)的BOD5与
CODcr的监测数据,回归出BOD5与CODcr相关关系的
一元线性方程,见表3.并进行了实测值与糆算值的比
较,见表4.生化废水的相对回收率均值为101%,相对
误差均值为1.13%.说明回归方程有较好的准确度.
,表3 生化废水的BOD5与CODcr值(mg/L)
序号 CODcr BOD5
1 2 3 4 5
6 7 8 9 10
517
662
780
845
976
1 130
1 342
1 511
1 729
2 080
254
330
439
468
500
574
749
865
973
1 002
相关式
r值
BOD5=12.0866+0.5214CODcr
0.9830
表4 生化废水BOD5与CODcr的实测值与BOD'5的
糆算值比较
序号
实测值CODcr
(mg/L)
实测值BOD5
(mg/L)
糆算值BOD'5
(mg/L)
相对回收率
(%)
相对误差
(%)
1 2 3 4 5
6 7 8 9 10
517662
780845
9761 130
1 342
1 511
1 729
2 080
254330
439468
500574
749865
9731 002
282357
419453
521601
712800
9141 097
111108
95 97
104105
95 92 94
109
11.0 8.2
-4.6
-3.2 4.2
4.7
-4.9
-7.5
-6.1 9.5
E均 101 1.13
Journal of Environment and Health,November 2000,Vol. 17,No. 6环境与健康杂志2000年11月第17卷第6E 361
张宗滨[4]通过测定20下的2,3,4日的BOD来
取代BOD5,从而达到快速测定BOD5的目的.E具体
表达式为:BOD5=KnBODn(n=2,3,4),E中K为比
例常数,由实验来确定.该方法不需要增加任何额外装
置,具有操作简单,实验周E短,应用范围广,精度较高
等特点.他选用数种化工废水实验表明,与标准法相
比,所得结果的最大E差小于8.0%,不同水质的K值
不同,应根据实验数据重新糆算.他认为此法适用于各
种可生化的水质.
吴E胜等[5]利用线性回归方程用BOD2来估算
BOD5.根据细菌生长繁殖曲线和BOD曲线分析,可知
0～24h间是微生物的诱导E处于迟缓状态,BOD值
变化一般,24～48 h为对数E,此E微生物迅速生长,
大量营养成分被吸收分解,BOD值增加最快,48 h后
为内源呼吸E即稳定E,因易分解的有机物已在前E
分解,剩下的是难以分解的,此后BOD值增加缓慢,
故可用BOD2来估算BOD5.他们通过对BOD特点及
BOD2与BOD5相互关系分析,得出的结论有相当的合
理性与准确性.
3 结语BOD5的测定是一个繁琐的过程,要探讨出一种
快速,准确,精密度高的完蒃的分析方法还需进一步研
究,以上几种快速测定法对工业废水处理,污染预报等
实际应用有一定的指导意义,但它们都是针对特定的
同一性质的废水而言.对于比对考核,仲裁分析等还必
须采用典稀释接种法.
外泌体（Exosomes）是细胞外囊泡（Extracellular vesicles, EVs）的一种，大小在30-150nm，由细胞内的多泡小体（Multivesicular bodies,MVB）与细胞膜融合后以外分泌的形式释放到细胞外，广泛存在于细胞培养上清以及各种体液中，包括血液、淋巴液、唾液、尿液、精液、乳汁等。
外泌体广泛参与细胞间物质运输与信息传递，调控细胞生理活动。同时，外泌体具有抗原提呈、免疫逃逸、诱导正常细胞转化、促进肿瘤发生和转移等作用；此外，外泌体还可以作为“天然的纳米粒子”来进行药物递送。
外泌体研究通常进行以下几个方面的实验：1.试剂盒或差速超速离心分离；2.透射电镜拍摄（TEM）；3.纳米粒径跟踪分析（NTA）；4.Western Blot检测蛋白标志物；5.外泌体高通量测序/芯片；6.外泌体标记或示踪；7.外泌体细胞功能检测；8.外泌体动物模型验证等。
?其中，外泌体分离之后，需要经过一系列鉴定才能确定分离的是外泌体。鉴定方法从物理特征到表面分子标志物，多角度进行鉴定。
(1)透射电镜鉴定法 ：简称TEM，适合外泌体双层囊膜超微结构观察，即通常为茶托型或一侧凹陷的半球形。
(2)纳米颗粒跟踪分析法 ：简称NTA，该方法能保证外泌体原始状态、检测速度快，检测后能提供外泌体粒径和浓度信息。
(3)Western blot分子标志物检测 ：外泌体标志蛋白包括四跨膜蛋白家族，如CD9、CD63和CD81；细胞质蛋白，如肌动蛋白（Actin）和钙磷脂结合蛋白（Annexins）；参与生物功能的分子，如凋亡转接基因2互作蛋白X（ALIX）、肿瘤易感基因101蛋白（TSG101）、热休克蛋白（HSP70、HSP90），以及细胞分泌的特异性蛋白。
(4)外泌体高通量检测 ： 外泌体内含有与细胞来源相关的蛋白质和核酸，可以运输蛋白质、mRNA、miRNA、lncRNA、circRNA等进入受体细胞，参与细胞间通讯。不同细胞来源的外泌体所含有的蛋白成分和RNA不太相同，可作为多种疾病的早期诊断标记物，也能作为靶向药物的载体进行疾病治疗。
(5)外泌体标记或示踪： 对分离的外泌体进行体外标记或活体示踪，有助于对外泌体的功能进行进一步的研究。目前常用亲脂性染料对外泌体进行标记，亲脂性染料主要包括两类，一是PKH67（绿色）和PKH26，二是DiI（橙色荧光）、DiO（绿色荧光）、DiD（红色荧光）、DiR（深红色荧光）。
(6)外泌体功能研究： 将标记的外泌体加入受体细胞培养基中，与受体细胞进行共培养，观察细胞的功能变化，如细胞增殖、迁移与侵袭、细胞凋亡等；或者将外泌体注射入动物模型中，观察动物表型变化和检测动物相关指标。
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